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液氮罐在生物學(xué)實驗中的應(yīng)用

日期：2024-11-26 00:30

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摘要：

液氮罐在生物、醫(yī)學(xué)、畜牧等都有很大用途，廣泛用于畜牧業(yè)良種畜精液冷凍貯存；醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)的****、皮膚、血液、細胞的低溫保存，生物工程、工業(yè)冷裝配、金屬材料冷處理、低溫粉碎及超導(dǎo)等廣大域。

、在細胞培養(yǎng)過程中的使用細胞培養(yǎng)的般過程，主要包括準備、取材、培養(yǎng)和凍存復(fù)蘇4步。為保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度般用196℃液氮溫度，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑(般為甲基亞砜或甘油)的培養(yǎng)基，以定的冷卻速度凍存，終保存于液氮中。在低的溫度下，細胞保存的時間幾乎是無限的。目前美標準細胞庫或細胞銀行(ATCC)液氮凍存有3200個已經(jīng)過鑒定的細胞系(1992)，其中包括來自正常人和各種**患者的皮膚成纖維細胞系和來自不同物種的近75個雜交瘤細胞株。

、胚胎冷凍保存技術(shù)胚胎冷凍保存技術(shù)是指在低溫條件下利用低溫保護劑保存胚胎的門技術(shù)。這技術(shù)是20世紀后半葉隨著人工授精技術(shù)廣泛應(yīng)用而產(chǎn)生的，目前已成為了現(xiàn)**命科學(xué)研究必備的手段之。動物胚胎的冷凍保存原理就是因為低溫降低了胚胎內(nèi)的變質(zhì)反應(yīng)速度，溫度越低，胚胎保存時間就越長。目前已研究出多種胚胎冷凍保存方法，包括慢速冷凍法、快速冷凍法、步冷凍法、直接移植冷凍法和玻璃化冷凍法等。

其中玻璃化冷凍法的步驟如下：

①將胚胎在室溫下放人25％玻璃化溶液(VS液)中預(yù)處理15min；

②將預(yù)處理后的胚胎放在濃度(75％90％)的VS液中保存20—40min；

③將經(jīng)過兩步抗凍劑處理的胚胎直接投入液氮中保存。此外還可以用液氮罐保存菌種、疫苗、骨組織、精子等物質(zhì)，均可達到很好的長期存儲的效果。

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