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如何判斷色譜柱什么時候該換新柱了？
日期：2024-11-26 01:39
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摘要：色譜工作者常會碰到這樣的問題，什么時候該換色譜柱了? 色譜柱的塔板數(shù)能體現(xiàn)色譜柱的狀態(tài)嗎?確定表明支色譜柱應(yīng)該“退休”的標(biāo)準(zhǔn)，從經(jīng)驗來看，當(dāng)支色譜柱的塔板數(shù)降低到新柱子時的百分之多少時就可以認(rèn)為該色譜柱不能再使用了呢?在您的實驗室里是如何判斷根色譜柱不可以再用了呢?
相信每個色譜工作者都會關(guān)心分辨率，分辨率是考察根色譜柱分離具體樣品的好壞程度的指標(biāo)。色譜的**任務(wù)就是為了使每個峰完成分離，我們在實際工作中需要得到合理峰寬的窄峰以便獲得較低的檢測限(這已經(jīng)不是什么難題，現(xiàn)在的色譜柱都可以達(dá)...
色譜工作者常會碰到這樣的問題，什么時候該換色譜柱了? 色譜柱的塔板數(shù)能體現(xiàn)色譜柱的狀態(tài)嗎?確定表明支色譜柱應(yīng)該“退休”的標(biāo)準(zhǔn)，從經(jīng)驗來看，當(dāng)支色譜柱的塔板數(shù)降低到新柱子時的百分之多少時就可以認(rèn)為該色譜柱不能再使用了呢?在您的實驗室里是如何判斷根色譜柱不可以再用了呢?
相信每個色譜工作者都會關(guān)心分辨率，分辨率是考察根色譜柱分離具體樣品的好壞程度的指標(biāo)。色譜的**任務(wù)就是為了使每個峰完成分離，我們在實際工作中需要得到合理峰寬的窄峰以便獲得較低的檢測限(這已經(jīng)不是什么難題，現(xiàn)在的色譜柱都可以達(dá)到這個要求)。
較好的方法是使用壓力、分辨率和峰形的混合指標(biāo)來考察根色譜柱的狀態(tài)。壓力的測量是容易的，通常我們確定的色譜方法要滿足以下的要求：用新柱子時柱壓不于2500psi，在任何情況下壓力都不超過3000psi。盡管現(xiàn)代的液相色譜系統(tǒng)都可在更的壓力下使用，但由于壓產(chǎn)生的系統(tǒng)損耗和泄漏的問題會很嚴(yán)重。當(dāng)壓力超過3000psi時，考慮更換進樣器和色譜柱之間的0.5mm孔徑的在線濾片。如果更換濾片后壓力仍然，則色譜柱的濾片或者是色譜柱已經(jīng)被污染，這提示我們該換柱子了。有統(tǒng)計表明，超過60%的色譜柱損壞是由于壓力過的原因。
分辨率是我們考察色譜柱的個非常重要的指標(biāo)，只要兩個組分可以獲得基線分離，對該分析物的定量就不會有什么問題。對于對稱的斯峰來講，1.5的分辨率即可得到基線分離;若Rs在1.7至2.0之間則更好。若峰拖尾嚴(yán)重則需要更的分辨率。使用分辨率作為色譜柱的評價指標(biāo)的好處在于我們可以直觀地看到相鄰的峰的分離情況。
另外個考察色譜柱質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)是峰形拖尾情況，廠測試報告的峰形都非常漂亮，但這并不代表該色譜柱分析實際樣品的情況。實際樣品中總是含有或多或少引起峰形拖尾的組分。值得提的是含有氮原子的化合物，這些化合物和硅膠骨架上的游離硅羥基結(jié)合非常緊密，隨著色譜柱使用時間越長，鍵合相流失，拖尾則更加嚴(yán)重。然而拖尾情況的改變不像分辨率的改變那樣能夠馬上看出來?；诖耍枚▊€拖尾因子的上限，如美藥典規(guī)定拖尾因子不超過1.8。
相信每個色譜工作者都會關(guān)心分辨率，分辨率是考察根色譜柱分離具體樣品的好壞程度的指標(biāo)。色譜的**任務(wù)就是為了使每個峰完成分離，我們在實際工作中需要得到合理峰寬的窄峰以便獲得較低的檢測限(這已經(jīng)不是什么難題，現(xiàn)在的色譜柱都可以達(dá)到這個要求)。
較好的方法是使用壓力、分辨率和峰形的混合指標(biāo)來考察根色譜柱的狀態(tài)。壓力的測量是容易的，通常我們確定的色譜方法要滿足以下的要求：用新柱子時柱壓不于2500psi，在任何情況下壓力都不超過3000psi。盡管現(xiàn)代的液相色譜系統(tǒng)都可在更的壓力下使用，但由于壓產(chǎn)生的系統(tǒng)損耗和泄漏的問題會很嚴(yán)重。當(dāng)壓力超過3000psi時，考慮更換進樣器和色譜柱之間的0.5mm孔徑的在線濾片。如果更換濾片后壓力仍然，則色譜柱的濾片或者是色譜柱已經(jīng)被污染，這提示我們該換柱子了。有統(tǒng)計表明，超過60%的色譜柱損壞是由于壓力過的原因。
分辨率是我們考察色譜柱的個非常重要的指標(biāo)，只要兩個組分可以獲得基線分離，對該分析物的定量就不會有什么問題。對于對稱的斯峰來講，1.5的分辨率即可得到基線分離;若Rs在1.7至2.0之間則更好。若峰拖尾嚴(yán)重則需要更的分辨率。使用分辨率作為色譜柱的評價指標(biāo)的好處在于我們可以直觀地看到相鄰的峰的分離情況。
另外個考察色譜柱質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)是峰形拖尾情況，廠測試報告的峰形都非常漂亮，但這并不代表該色譜柱分析實際樣品的情況。實際樣品中總是含有或多或少引起峰形拖尾的組分。值得提的是含有氮原子的化合物，這些化合物和硅膠骨架上的游離硅羥基結(jié)合非常緊密，隨著色譜柱使用時間越長，鍵合相流失，拖尾則更加嚴(yán)重。然而拖尾情況的改變不像分辨率的改變那樣能夠馬上看出來?；诖耍枚▊€拖尾因子的上限，如美藥典規(guī)定拖尾因子不超過1.8。
確定色譜柱“拋棄”標(biāo)準(zhǔn)的時間是當(dāng)我們開發(fā)分析方法或作方法認(rèn)證的時候。通常，在開發(fā)分析方法的過程中你會試驗幾根色譜柱，分析足夠多的實際樣品，你知道當(dāng)分離變差的時候是什么樣的情況。我傾向于在開始時使用個寬的范圍。我們的經(jīng)驗是這樣的：你如果在開始時緊縮系統(tǒng)適用性要求，在方法認(rèn)證后再放寬這個要**很困難的。在分析實際樣品之前進行系統(tǒng)適用性考察，以確保該色譜方法滿足分析者可以接受的標(biāo)準(zhǔn)。
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