微量分光光度計(jì)原理及應(yīng)用介紹

那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于微量分光光度計(jì)原理及應(yīng)用介紹：

    微量分光光度計(jì)能夠快速準(zhǔn)確的定量檢測(cè)核酸、蛋白質(zhì)等溶液。具有使用方便、消耗樣品少(僅2μl)、不用預(yù)熱、能迅速清理殘留樣品、不需要比色皿或其它樣品定位裝置、樣品不需要稀釋等特點(diǎn)，常用于核酸，蛋白定量以及生長(zhǎng)濃度的定量，目前已成為眾多實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)儀器。

  工作原理

    超微量分光光度計(jì)進(jìn)行濃度測(cè)定的原理是根據(jù)朗伯-比爾（Lamber-Beer）定律，

A＝K·C·L

 式中，A為吸光度；K為吸（消）光系數(shù)；C為溶液的濃度；L為液層厚度。此公式說(shuō)明：在入射光一定時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度及液層厚度成正比。此式就是光的吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式，又叫朗伯-比爾定律。

  核酸定量

     核酸的定量是超微量分光光度計(jì)使用頻率高的功能。可以定量測(cè)定溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA以及RNA含量。這是由于核酸、核苷酸及其衍生物都具有共軛雙鍵，具有紫外吸收的特性，大的吸收波長(zhǎng)在260nm，吸收波谷在230nm。

    除了核酸濃度，分光光度計(jì)同時(shí)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度，如A260/A280的比值，用于評(píng)估樣品的純度，因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?/span>280nm。純凈的樣品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類(lèi)物質(zhì)的影響。A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。

  蛋白質(zhì)直接定量

     這種方法是在280nm波長(zhǎng)，直接測(cè)試蛋白。蛋白質(zhì)直接定量方法，適合測(cè)試較純凈、成分相對(duì)單一的蛋白質(zhì)。紫外直接定量法相對(duì)于比色法來(lái)說(shuō)，速度快，操作簡(jiǎn)單；但是容易受到平行物質(zhì)的干擾，如DNA的干擾；另外敏感度低，要求蛋白的濃度較高。

  比色法蛋白質(zhì)定量

     蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物，比色法測(cè)定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分：氨基酸（如酪氨酸，絲氨酸）與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng)，產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān)，從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。

     比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry 等幾種方法。

以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于微量分光光度計(jì)原理及應(yīng)用介紹。

我們上海嘉鵬科技有限公司是專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測(cè)定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀、蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等十幾個(gè)系列產(chǎn)品的廠家，歡迎大家前來(lái)訂購(gòu)